Apoptose

Mesure des fragments solubles du filament intermédiaire de la Kératine 18 (K18)* humaine contenant le néo-épitope M30 (K18Asp396-NE).
Exprimé par les cellules épithéliales humaines.

- Sérum ou  Plasma humain (EDTA, Citrate, Héparine), K18Asp396-NE  (M30)  excrété par des cellules humaines positives pour le K18.
Dans le cadre d’une étude, il est nécessaire d’utiliser le même type de  milieu  (sérum ou plasma)

- Plasma de souris : on peut l’utiliser pour les xénogreffes humaines.
Réf : Olofsson et al, Cancer Biomark, 2009

- Lysat cellulaire ou Surnageant de cultures de cellules  apoptotiques  positives pour K18 (épithélial) ou de tissus. Pour les cultures  cellulaires :  on peut utiliser soit le M30 Apoptosense® soit le
M30  CytoDeath®.

Pur-sang: à la température ambiante pendant 24 heures*
On peut conserver les échantillons (sérum et plasma) 7 jours à la
température ambiante, 2 semaines à 2 – 8°C, 9 mois minimum à –20°C ou
2 ans minimum à -80°C.
Eviter les congélations/décongélations répétées.

Normal                       ≤ 150 U/l 
Faiblement élevé          150 – 200 U/l
Elevé                         > 200 U/l

On a dosé la K18  chez 200 donneurs de sang suédois apparemment normaux. Avec le kit M30 Apoptosense, on a observé une distribution similaire chez l’homme et la femme, indépendante de l’âge. On en a déduit que le cut-off pour une valeur de K18 élevée était > 200 U/l. Dans le cas de suspicion de fibrose ou de stéatose hépatique, des valeurs comprises entre 150 et 200 U/l suggèrent une fibrose moyenne (par exemple NAFL). Des valeurs > 200 U/l indiquent une atteinte sévère du foie (NASH)

Homme, Primates

Effet crochet
On n’observe pas d’effet crochet jusqu’à 50 000 U/l, ce qui est très supérieur aux concentrations de K18Asp396-NE (M30) observées dans les échantillons de cultures cellulaires.

Le néo-épitope M30 (K18Asp396-NE) est un indice spécifique de la mort des cellules épithéliales par activation des caspases -3, -7 ou -9.
Dosage quantitatif du biomarqueur K18Asp396-NE (« Antigène M30 ») de l’apoptose des cellules exprimé par les lignées de cellules épithéliales en cours de nécrose in vitro ou in vivo. Les cellules ou les tissus doivent être d’origine épithéliale (par ex : rein, intestin, colon, poumon ou foie) et exprimer la K18.

*Note:
caspase-cleaved K18 = ccK18 previously Cytokeratin 18 (CK18/ccCK18)