ELISA Complement Activity Analysis

Quantification des fragments C3a

Sérum, Plasma EDTA.

Le recueil des échantillons est une phase critique, car il faut éviter de générer du C3a dans l’échantillon. Pour le plasma, recueillir l’échantillon sur de l’EDTA disodique et le centrifuger à 2000 g à 2-8°C. Cette opération doit être réalisée immédiatement. Les échantillons doivent être préparés, dosés immédiatement ou conservés sur de la glace pendant un maximum de 2 heures, ou encore conservés à -70°C après addition d’une solution stabilisante.

• Sérum : 71.0 – 589.2 ng/ml
• Plasma EDTA : 33.8 – 268.1 ng/ml

Homme, Cynomolgus Macaque, Babouin, Singe rhésus

Anticorps monoclonal de souris se fixant spécifiquement sur C3a-desArg

Le dosage du fragment C3a permet de de doser la quantité de C3a-desArg présent dans le plasma EDTA et le sérum humain, ainsi que dans d’autres échantillons expérimentaux. Dans les conditions normales, l’activation des Voies Classique, Alternative ou de la Lectine du Complément se traduit par la formation d’une enzyme multi-moléculaire C3 convertase capable de cliver le C3 en C3a et C3b. Le C3a est un fragment protéique de faible poids moléculaire (environ 9 kD) composé de
77 acides aminés. Le C3a est rapidement métabolisé par une enzyme sérique, la carboxypeptidase N, pour donner un complexe plus stable, composé de 76 acides aminés, le C3a-desArg. C’est pourquoi, le dosage de C3a-desArg permet de connaître de façon fiable le taux d’activation du complément de l’échantillon.
 

Fragment C3a, C3a-des Arg, Activation du Complément, Biocompatibilité, Hémocompatibilité, Voie du Complément, Cascade du Complément, ASTM F1984-99, ASTM F2065-00